色譜柱它是一種分離分析手段,分離是核心因此擔負分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。對色譜柱的要求是柱效高、選擇性好,分析速度快等。
1、用過濾和脫氣的流動相(不含緩沖鹽)徹底沖洗色譜儀的泵和管路,務必使系統(tǒng)中不含氣泡。
2、根據(jù)色譜柱上所標示的流動相流向,將色譜柱入口與泵端管路相連,柱出口不連。
3、將泵的流速設為0.1mL/min或更低,流速緩慢地.上升到正常流速(t>5min)。
4、當溶劑從色譜柱出口端自由流出時,將流速設為0,把柱出口與檢測器端的管路相連。
5、用10-30倍柱體積的流動相、正常流速平衡色譜柱。
6、氨基柱、氰基柱既可在正相環(huán)境下使用,也可在反相環(huán)境下工作。當需要從反相變?yōu)檎嗷蛘嘧優(yōu)榉聪鄷r,需要用20-30倍柱體積的THF作為過渡溶劑沖洗系統(tǒng),否則易使泵的單向閥堵塞,出現(xiàn)壓力異常的現(xiàn)象。
為了使色譜柱與儀器系統(tǒng)達最佳的連接效果,應盡量使用與色譜柱接口相匹配的螺帽和錐形接頭,如原來的接頭長期匹配其他類型的色譜柱,建議在連接新色譜柱前應檢查匹配情況,避免造成色譜柱的損壞或因色譜柱不匹配造成的漏液。
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