手性色譜柱的五大常識

　　手性色譜柱（Chiral HPLC Columns）是由具有光學活性的單體，固定在硅膠或其它聚合物上制成手性固定相（Chiral Stationary Phases）。那么下面就跟著研創(chuàng)生物一起來看看手性色譜柱的五大常識吧！

　　1、色譜法

　　答：色譜法利用不同物質(zhì)在不同相態(tài)的選擇性分配，以流動相對固定相中的混合物進行洗脫，混合物中不同的物質(zhì)會以不同的速度沿固定相移動，最終達到分離的效果。常用的色譜檢測有高效液相色譜（HPLC）、超臨界色譜（SFC）、模擬移動床（SMB）、氣相色譜（GC）、薄層色譜（TLC）等，可根據(jù)樣品特性選擇最合適的色譜檢測方法。

　　2、正相&反相

　　答：液相色譜有正相和反相之分。如果固定相的極性大于流動相的極性，就稱為正相色譜；如果固定相的極性小于流動相的極性，則稱為反相色譜。在正相色譜中，極性小的物質(zhì)先出峰，極性大的物質(zhì)后出峰；反相則相反。在大賽璐開發(fā)的方法中，通常把以正己烷、醇、甲基叔丁基醚、乙酸乙酯、四氫呋喃等有機溶劑為流動相的方法稱為正相方法；把以水（中性、酸性或堿性）和有機溶劑共同作為流動相的方法稱為反相方法；把以100%的醇或乙腈做流動相的方法稱為極性模式。

　　3、多糖衍生物手性固定相的手性拆分機理

　　答：在多糖衍生物手性固定相上進行的拆分機理目前尚部完全清楚，基于Dalgliesh提出的“三點作用原理”，認為在對映體和CSP之前可能存在π-π作用、偶極-偶極作用、氫鍵作用及非手性作用（如空間效應(yīng)）等作用力，這些作用力的綜合結(jié)果將使兩個對映體與固定相之間形成非對映體絡(luò)合物的穩(wěn)定性有差異而得到分離，且差異性越大，實現(xiàn)分離的可能性越大。

　　4、評價柱性能的參數(shù)

　　答：評價一支柱子性能的參數(shù)通常有：色譜峰的保留時間、理論塔板數(shù)、拖尾因子和分離度等。大賽璐新柱出廠都嚴格地經(jīng)過QC測試，并附有檢測報告。這里需要提出的是，因為表觀參數(shù)不但與柱子本身性能有關(guān)，與使用的儀器也有很大關(guān)系，不同儀器間的檢測結(jié)果會有差別。

　　5、手性柱的最大載樣量是多少？

　　答：手性柱的最大載樣量取決于柱子的尺寸、流動相條件及樣品本身的性質(zhì)（溶解度等），因此很難給出一個明確的值。超出柱子的負載量（進樣體積太大或樣品濃度過高）會使得峰展寬或峰融合。