氣相色譜柱前衍生化的常見(jiàn)方法

衍生技術(shù)是通過(guò)化學(xué)變化將樣品中難以分析和檢測(cè)的目標(biāo)化合物定量轉(zhuǎn)化為另一種易于分析和檢測(cè)的化合物可以通過(guò)后者的分析和檢測(cè)進(jìn)行定性和定量分析。

柱前衍生條件

首先，如果要在色譜中應(yīng)用柱前衍生化，其衍生反應(yīng)應(yīng)應(yīng)滿(mǎn)足以下條件：

1.反應(yīng)迅速.定量進(jìn)行，反應(yīng)重復(fù)性好，反應(yīng)條件不苛刻，操作方便；

2.反應(yīng)選擇性高，最好只與目標(biāo)化合物反應(yīng)，即反應(yīng)具有專(zhuān)一性；

3.衍生反應(yīng)產(chǎn)物只有一種，副產(chǎn)品和過(guò)多的衍生化試劑不影響目標(biāo)化合物的分離和檢驗(yàn)；

4.衍生化試劑易得，實(shí)用性好。

常見(jiàn)的氣相色譜衍生反應(yīng)

1.酯化衍生方法

（1）甲醇法：有機(jī)酸和甲醇在催化劑環(huán)境中加熱，發(fā)生酯化反應(yīng)，產(chǎn)生有機(jī)酸甲酯。三氟化硼一般用作催化劑，三氟化硼一般進(jìn)入甲醇制備酯化劑，由于加熱過(guò)程，有一定的風(fēng)險(xiǎn)，現(xiàn)在也有商業(yè)三氟化硼甲醇溶液可以直接購(gòu)買(mǎi)和使用。

（2）重氮甲烷法：重氮甲烷能與有機(jī)酸反應(yīng)產(chǎn)生有機(jī)酸甲酯，釋放氮?dú)?。該方法?jiǎn)單有效，反應(yīng)速度快，轉(zhuǎn)化率高，副作用少，不引入雜質(zhì)，但應(yīng)在非水介質(zhì)中進(jìn)行。雖然反應(yīng)條件柔和，但重氮甲烷不穩(wěn)定，具有爆炸性.有毒，在制備和使用時(shí)要特別小心。此外，酚羥基在常溫下可與重氮甲烷發(fā)生反應(yīng)，但在0℃避免酚羥基反應(yīng)。

（3）三氟乙酸酐法：在三氟乙酸酐的存在下，有機(jī)酸和酸能反應(yīng)生成酯，更適合酯化空間阻力大的有機(jī)酸、醇或酚。

（4）其他酯化方法:有時(shí)為了提高方法的靈敏度和選擇性，需要制備甲酯以外的酯。方法類(lèi)似于甲酯化方法，可以使用重氮乙烷.重氮丙烷.重氮甲苯取代重氮甲烷制成相應(yīng)的酯，這些實(shí)際性能穩(wěn)定.爆炸性小。三氟化硼丙醇.丁醇或戊醇溶液與有機(jī)酸反應(yīng)也可以產(chǎn)生相應(yīng)的丙酯.丁酯或戊酯。

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?；芙档土u基.氨基.硫基的極性提高了這些化合物的色譜性能，增強(qiáng)了這些化合物的揮發(fā)性，增加了一些易氧化合物的穩(wěn)定性。當(dāng)?；牒宣u離子的?；鶗r(shí)，也可以改善使用ECD探測(cè)器的靈敏度。常用的酰鹵化試劑有酰鹵化試劑.酸酐和反應(yīng)活性?；?。

(1)乙酰化法:標(biāo)準(zhǔn)乙?；ㄊ菍悠啡苡诼确轮?，與乙酸酐、乙酸在50℃反應(yīng)2-6h，真空出去留下試劑。乙酸鈉也可以作為堿催化劑，乙酸酐可以作為乙酰化試劑進(jìn)行乙?；磻?yīng)，用于糖分析。.三甲胺.甲基咪唑也可用作偏堿催化劑。乙?；磻?yīng)一般在非水介質(zhì)中進(jìn)行，但乙?；瘯r(shí)可在溶液中進(jìn)行。

(2)多氟?；?常用的多氟化試劑是三氟乙酰（TFA）.五氟丙酰（PFP）和七氟丁酰（HFB），其活性是TFA>PFP>HFB。TFA和PFP衍生物揮發(fā)性強(qiáng)，衍生物揮發(fā)性強(qiáng)HFB的衍生物ECD靈敏度高。多氟?；磻?yīng)時(shí)間不僅取決于多氟?；噭┑幕钚?，還取決于目標(biāo)化合物的活性。在大多數(shù)情況下，氟酰化反應(yīng)不需要溶劑，但在某些前提下也需要溶劑，有時(shí)還需要部分堿催化劑。

3.鹵化衍生法

在目標(biāo)化合物中引入鹵原子ECD提高檢測(cè)靈敏度，提高揮發(fā)性和穩(wěn)定性，常用的鹵化衍生方法如下：

（1）鹵素法：鹵素直接作為衍生化學(xué)試劑處理樣品，鹵素的作用是祝?；蛱娲?/span>

（2）鹵化氫法：常見(jiàn)鹵化氫法：常見(jiàn)鹵化氫法：HCl和HBr衍生化試劑與不飽和鏈或與羥基發(fā)生替代反應(yīng)

（3）N-溴代丁二酰亞胺（NBS）法：NBS它是一種選擇性很強(qiáng)的鹵化衍化試劑，能使烯丙位氫原子發(fā)生溴代反應(yīng)