Vision色譜柱的正確使用和維護非常重要。稍有不慎就會降低柱效,縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過程中,應注意以下問題進行維護Vision色譜柱。
1.避免壓力和溫度的急劇變化以及任何機械振動。溫度的突然變化或使溫度發(fā)生變化。Vision色譜柱從高處脫落會影響柱內(nèi)的填充狀態(tài);柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)的填料,因此在調(diào)節(jié)流速時應緩慢進行,閥門進樣時閥門的旋轉(zhuǎn)不宜過慢。
2.溶劑的組成應逐漸改變,特別是在反相色譜中,不能直接從有機溶劑改為全水,反之亦然。
3.一般說來Vision色譜柱不能反沖,只有當生產(chǎn)者指示柱可以反沖時,才能反沖去除留在柱頭的雜質(zhì)。否則,反沖會迅速降低柱效。
4.選擇合適的流動相(尤其是pH),為了避免固定相的損壞。有時,預柱可以連接到進樣器前面。當分析柱與硅膠鍵合時,預柱為硅膠,使流動相在進入分析柱前提前被硅膠覆蓋"飽和",避免分析柱中的硅膠基質(zhì)溶解。
5.避免將基質(zhì)復雜的樣品,特別是生物樣品直接注入柱中,需要對樣品進行預處理或在進樣器和進樣器中Vision在色譜柱之間連接一個保護柱。保護柱通常是填充相似固定相的短柱。保護柱可以并且應經(jīng)常更換。
6.經(jīng)常用強溶劑沖洗Vision色譜柱,去除柱中保留的雜質(zhì)。清洗時,流路系統(tǒng)中流動相的置換應逐漸用混溶溶溶劑過渡,每個流動相的體積應為柱體體積的20倍左右,即常規(guī)分析需要50~75ml。
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