干貨 | HPLC峰型問題之肩峰原因分析

肩峰指的是在流出曲線或吸收曲線的峰上出現(xiàn)的不成峰形的小曲折，形狀類似肩膀，故稱為肩峰。

肩峰

原因：進(jìn)樣量過大或是樣品濃度過高。

解決方法：減少進(jìn)樣量或稀釋樣品或換用尺寸更大、載樣量更高的色譜柱。

原因：樣品溶劑和初始比例流動(dòng)相的溶劑洗脫能力不同或溶解能力較差以及為了樣品的溶解性或穩(wěn)定性加入了一點(diǎn)的緩沖液，緩沖液的酸堿性可能會(huì)導(dǎo)致樣品轉(zhuǎn)化，從而導(dǎo)致肩峰現(xiàn)象。

解決方法：調(diào)整流動(dòng)相pH或配比；使用初始比例流動(dòng)相溶解樣品；使用溶劑效應(yīng)消除器；更換緩沖液。

注意：樣品要現(xiàn)配現(xiàn)用，避免樣品溶解液的有機(jī)相比例、pH值發(fā)生變化而導(dǎo)致的溶劑效應(yīng)

原因：樣品或者系統(tǒng)中存在同一時(shí)間出峰的雜質(zhì)，干擾主峰峰形。

解決方法：

1.排查雜質(zhì)干擾來源，判斷是由系統(tǒng)引入雜質(zhì)還是樣品引入雜質(zhì)。

2.若是系統(tǒng)引入雜質(zhì)，可以通過清洗流動(dòng)相過濾頭；清洗進(jìn)樣針；清洗液相管路；清洗或更換色譜柱、保護(hù)柱等。

3.若是樣品引入雜質(zhì)，可以通過優(yōu)化前處理方法，對(duì)于樣品進(jìn)行純化；選擇分離能力更強(qiáng)的色譜柱。

原因：流動(dòng)相或者進(jìn)樣溶劑中影響樣品，干擾主峰峰形

 解決方法：

1.排查流動(dòng)相及進(jìn)樣溶劑，判斷是流動(dòng)相的問題還是進(jìn)樣溶劑的問題。

2.若是流動(dòng)相的問題，可以重新配置流動(dòng)相；是流動(dòng)相pH在化合物pKa±2范圍外。

3.若是進(jìn)樣溶劑的問題，可以使用與初始比例流動(dòng)相相同的進(jìn)樣溶劑；使用溶劑效應(yīng)消除器。

原因：由于色譜柱長(zhǎng)時(shí)間使用后，色譜柱出現(xiàn)坍塌或者、理論塔板數(shù)降低造成的。

解決方法：

1.驗(yàn)證色譜柱塔板數(shù)，可根據(jù)色譜柱的檢測(cè)報(bào)告方法，測(cè)試其當(dāng)前理論塔板數(shù)。

2.更換新的色譜柱。