手性色譜柱的使用須留意哪些事項(xiàng)？

手性色譜柱用于分析或制備手性化合物，分為正相和反相兩種類型，具體填料包括環(huán)糊精手性柱、纖維素衍生物手性柱和配體交換手性柱等不同種類。今天研創(chuàng)生物小編給大家介紹下使用手性色譜柱的注意事項(xiàng)。

1、在進(jìn)行樣品檢測(cè)之前，務(wù)必仔細(xì)詢問(wèn)寄樣人有關(guān)樣品可能含有的溶劑，若在工藝中使用丙酮、氯仿、DMF、二甲基亞砜、乙酸乙酯、二氯甲烷、THF等溶劑，則應(yīng)盡量將樣品烘干。最好將樣品溶解在流動(dòng)相中，并通過(guò)μm濾膜進(jìn)行過(guò)濾。切勿使用強(qiáng)堿性物質(zhì)作為流動(dòng)相添加劑或溶解樣品，因?yàn)檫@可能會(huì)破壞手性柱填料中的硅膠成分。

2、當(dāng)系統(tǒng)中或者色譜柱中含有高濃度的異丙醇或者乙醇時(shí)，由于它們的粘度較大，使用平衡色譜柱時(shí)需特別留意壓力的變化?？梢赃x擇低流速進(jìn)行平衡，待柱壓下降后再緩慢增加至所需的流速。

3、樣品檢測(cè)完成后，以100%無(wú)水異丙醇清洗色譜柱，在3小時(shí)內(nèi)進(jìn)行min級(jí)沖洗。使用100%無(wú)水乙醇時(shí)柱內(nèi)壓力較高，因此不宜設(shè)置過(guò)快的流速，應(yīng)在沖洗過(guò)程中留意壓力的變化。若壓力超過(guò)50bar，最好將流速調(diào)至min級(jí)，并可考慮延長(zhǎng)沖洗時(shí)間。

4、絕大多數(shù)手性毛細(xì)管柱所使用的固定液是經(jīng)過(guò)環(huán)糊精改性處理的物質(zhì)。環(huán)糊精連接到不同的官能團(tuán)上后具有不同的極性，為了選擇合適的柱子，首先需明確您要制備的產(chǎn)物類型，再選用適合分離效果的環(huán)糊精固定液種類。

5、手性色譜柱的保存條件對(duì)于其使用壽命和分離效果至關(guān)重要。一般來(lái)說(shuō)，色譜柱應(yīng)存放在干燥、陰涼、通風(fēng)良好的環(huán)境中，避免陽(yáng)光直射和高溫。此外，長(zhǎng)期未使用的色譜柱應(yīng)定期活化，以保持其最佳性能。

6、在手性色譜柱的使用過(guò)程中，應(yīng)避免劇烈的壓力波動(dòng)，因?yàn)檫@可能會(huì)導(dǎo)致柱床塌陷，影響分離效果。因此，在啟動(dòng)和關(guān)閉色譜系統(tǒng)時(shí)，應(yīng)緩慢調(diào)整流速，確保壓力穩(wěn)定。

7、對(duì)于不同的樣品，可能需要調(diào)整色譜柱的溫度以獲得最佳的分離效果。一般來(lái)說(shuō)，手性化合物的分離在較低的溫度下進(jìn)行，但具體溫度應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行調(diào)整。

8、最后，每次使用手性色譜柱后，應(yīng)及時(shí)清潔并干燥，以防止殘留的樣品對(duì)下一次實(shí)驗(yàn)造成影響。同時(shí)，建議定期更換色譜柱，以確保分離效果和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

總之，使用手性色譜柱時(shí)需要注意多個(gè)方面，包括樣品的處理、色譜柱的保存和活化、操作過(guò)程中的壓力控制、溫度的調(diào)整以及色譜柱的清潔和更換等。只有在嚴(yán)格遵守這些注意事項(xiàng)的前提下，才能充分發(fā)揮手性色譜柱的優(yōu)勢(shì)，得到準(zhǔn)確、可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。