手性化合物: 手性化合物(chiral compounds)是指分子量、分子式相同,但空間結(jié)構(gòu)排列相反,如實物與其鏡中的映體。人的左右手結(jié)構(gòu)相同,大拇指至小指的次序也相同,但順序不同,左手是由左向右,右手是由右向左,所以叫做“手性”。也就是指一對分子,由于它們像人的兩只手一樣彼此不能重合,稱為手性化合物。 手性分離: 手性分離(chiral separation)是化學(xué)工程中的一個重要概念,它指的是將具有手性特征的分子(即手性分子)從其混合物中分離出來的過程。手性分子是指那些在鏡像成像下不能完全重合的分子,它們具有兩種非對稱的空間排列方式,互為對映異構(gòu)體。由于手性分子在物理和化學(xué)性質(zhì)上可能存在顯著差異,特別是在生物活性方面,因此手性分離在藥物化學(xué)、農(nóng)業(yè)科學(xué)、食品工業(yè)等領(lǐng)域具有重要意義。
適用場景:樣品溶于非極性溶劑,如烷烴類。 流動相組合:常用的有烷烴類(如正己烷)和醇類(如乙醇、異丙醇)。醇類起洗脫作用,烷烴類調(diào)節(jié)洗脫強度。 特點:分離過程相對穩(wěn)定,適用于多種手性固定相。 在手性色譜中,為改善目標(biāo)物的峰形,需要在流動相中添加酸或者堿。如果目標(biāo)物是酸性化合物,往往要在流動相中加入酸性添加劑,如三氟乙酸、乙酸、甲酸等。如果目標(biāo)物是堿性化合物,要在流動相中加入堿性添加劑,如二乙胺、三乙胺、丁胺、乙醇胺等。酸性或堿性添加劑的加入量一般為0.1%~0.3%,最大不超過0.5%,要注意色譜柱的pH耐受范圍。 注意:正相色譜柱在使用含酸/堿添加劑的正相流動相后,需用正己烷/異丙醇=90/10 沖洗色譜柱 30 min,然后用正己烷/異丙醇=90/10 封存。
適用場景:樣品溶于含水極性溶劑,如甲醇、乙醇等。 流動相組合:有機相(如乙腈、甲醇)和水相(如磷酸鹽緩沖液或純水)。有機相比例越高,目標(biāo)物保留時間越短。 特點:分離速度快,適用于對分離速度有較高要求的場景。 注意:反相色譜柱在使用含酸/堿添加劑的反相流動相后,需用乙腈/水=90/10 沖洗色譜柱 30 min,然后用乙腈/水=90/10 封存;使用含緩沖鹽流動相后,需要用不含緩沖鹽同比例流動相沖洗色譜柱 30min,然后用乙腈/水=90/10 封存。
溶解性:確定樣品溶于何種溶劑,是選擇分離模式的基礎(chǔ)。 極性:樣品的極性也是選擇分離模式的重要考慮因素。
匹配性:選擇與樣品性質(zhì)相匹配的固定相,以提高分離效率和效果。 適用性:了解不同固定相在不同分離模式下的表現(xiàn),選擇最適合的固定相。
分離度:根據(jù)目標(biāo)化合物的分離度要求,選擇合適的分離模式和條件。 分離速度:考慮實驗周期和效率,選擇適合的分離速度。
流動相比例:通過調(diào)整流動相中各組分的比例,優(yōu)化分離效果。 流速和溫度:調(diào)節(jié)流速和柱溫,以改善分離度和峰形。
案例一:氫溴酸西酞普蘭的測定,通過正相分離模式,顯著提高分離速度和效率。 分離條件: 樣品名稱/批號:氫溴酸西酞普蘭 儀器型號:賽默飛U3000 色 譜 柱:EnantioPak?Y1 溶 劑:乙醇 規(guī) 格:250*4.6mm,5μm 柱 溫:30℃ 進 樣 量:5μL 波 長:237nm 流 速:0.8mL/min 流 動 相:正己烷(0.1%DEA):異丙醇 譜圖: 案例二:卡洛芬的測定,通過反相分離模式,顯著提高分離速度和效率。 分離條件: 樣品名稱/批號:卡洛芬 儀器型號:賽默飛 U3000 色 譜 柱:EnantioPak?Y4-R 溶 劑:乙醇 規(guī) 格:250*4.6mm,5μm 柱 溫:25℃ 進 樣 量:5μL 波 長:254nm 流 速:1.0mL/min 流 動 相:乙腈:水(0.1%FA) 譜圖: 如上所示,用廣州研創(chuàng)的手性色譜柱進行拆分時,柱效和峰面積效果都很好,可以滿足市場上的大部分要求。各位小伙伴有手性樣品分離或需要篩選柱子,歡迎聯(lián)系、咨詢:18922204825/020-32051815。 結(jié)語: 手性分離模式的選擇是手性化合物分離中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。通過了解樣品性質(zhì)、固定相類型以及分離目標(biāo)和要求,結(jié)合實驗條件的優(yōu)化,我們可以精準(zhǔn)選擇適合的分離模式,提升分離效率和效果。希望本文能為您在手性領(lǐng)域的研究和應(yīng)用提供有益的參考和幫助。
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