HPLC分離度不夠？7大實用技巧幫你輕松搞定！

在高效液相色譜（HPLC）分析中，目標峰分離度不足是實驗室常見的“頭疼問題”。分離度差不僅影響數(shù)據(jù)準確性，還可能導致結(jié)果誤判！別擔心，本文總結(jié)了7大核心解決方案，從流動相優(yōu)化到儀器維護，手把手教你拯救重疊峰！

分離度（Resolution, Rs）是衡量色譜峰分離效果的核心指標，通常要求Rs≥1.5。當Rs不足時，可能是以下原因?qū)е拢?/p>

• 色譜柱性能下降（柱效低、填料污染）

• 流動相選擇不當（pH、有機相比例、添加劑不匹配）

• 方法參數(shù)不合理（流速、溫度、梯度程序）

• 樣品過載或基質(zhì)干擾

1. 流動相：從“配方”入手提升選擇性

• 調(diào)整有機相比例：
  增加乙腈/甲醇比例可縮短保留時間，反之延長。通過微調(diào)比例（如±5%），拉開目標峰與干擾峰的間距。

• 精準控制pH值（針對可電離化合物）：
  酸性物質(zhì)：降低pH抑制電離，增強保留；
  堿性物質(zhì)：升高pH促進電離，改善分離。

• 巧用添加劑：
  添加離子對試劑（如0.1%三氟乙酸）或緩沖鹽（如磷酸鹽），增強極性化合物分離。