色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。色譜柱可分為填充柱和開管柱兩大類。多為金屬或玻璃制作。有直管形、盤管形、U形管等形狀。液相色譜通常均采用填充柱。今天就來和大家一起聊一下關(guān)于色譜柱的常見問題吧。
液相色譜柱柱壓升高
造成柱壓升高的可能原因有很多。一般是由于色譜柱篩板或柱頭發(fā)生了堵塞,造成流動(dòng)相阻力加大所引起。當(dāng)然色譜系統(tǒng)其他部分發(fā)生堵塞,也可能表現(xiàn)為柱壓(系統(tǒng)壓力)升高。所以在發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)壓力升高時(shí),可首先使用兩通短接色譜柱觀察相同條件下系統(tǒng)本壓是否正常,排除壓力升高為系統(tǒng)其他部分造成。
色譜柱篩板堵塞
這往往是由于流動(dòng)相沒有過濾,或雖已過濾但濾膜孔徑過大或?yàn)V片損壞,使固體雜質(zhì)滯留在篩板上造成的。可采用反沖的方法去除堵塞物。對(duì)于5或3.5um填料的色譜柱,建議采用0.45um膜厚過濾樣品,1.8um填料的色譜柱,請采用0.2um膜厚過濾樣品。
同樣類似堵塞也會(huì)發(fā)生于排氣閥過濾芯、在線過濾器和保護(hù)柱,這時(shí)建議更換濾芯,在線過濾器內(nèi)的篩板或保護(hù)柱內(nèi)的柱芯。
非特異性吸附
當(dāng)部分組分在柱子上有較強(qiáng)的非特異性吸附,且當(dāng)前所用的流動(dòng)相難以將它們洗脫時(shí),強(qiáng)保留組分的累積則會(huì)造成阻力增大和壓力升高??墒褂眠m當(dāng)?shù)娜軇_洗以除去吸附物質(zhì)。
樣品的沉淀
當(dāng)樣品所用的溶劑與流動(dòng)相不一致時(shí),樣品進(jìn)入柱中時(shí)有可能因溶解度降低而沉淀出來,造成壓力升高。此時(shí)建議使用對(duì)樣品有較高溶解度的溶劑沖洗。
鹽晶體的析出
使用較高濃度的緩沖液或添加有緩沖液的流動(dòng)相后,如果沖洗不徹底,緩沖液中的無機(jī)鹽成分可能會(huì)殘留在體系之中。它們會(huì)因在新流動(dòng)相體系中溶解度降低而析出,造成流動(dòng)相阻力加大,壓力升高。
更換流動(dòng)相時(shí)置換不徹底
當(dāng)改換流動(dòng)相體系時(shí),不徹底的更換使不同性質(zhì)、互不相溶的流動(dòng)相存在一個(gè)體系中,也會(huì)造成壓力升高??墒褂没烊艿娜軇ó惐迹氐讻_洗。
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