一文讀懂色譜柱質(zhì)量過載與體積過載

液相色譜柱的過載是指在色譜分析過程中，由于樣品量或樣品濃度過高，使得色譜柱內(nèi)的分離效果受到影響，甚至導(dǎo)致分離失敗。色譜柱的過載可以分為質(zhì)量過載和體積過載，以下是對(duì)這兩種過載的詳細(xì)解讀：

定義：質(zhì)量過載又稱為濃度過載，是指在小體積進(jìn)樣時(shí)（體積未過載），由于進(jìn)樣濃度較高，靠近譜峰峰帶的固定相被飽和，即進(jìn)樣某一組分超過了色譜柱的載樣量而出現(xiàn)過載的現(xiàn)象。

定義：體積過載是指進(jìn)樣體積過大，造成柱子的體積超載。

表現(xiàn)：通常會(huì)導(dǎo)致較寬的平頭峰。隨著進(jìn)樣體積的增大，峰寬逐漸變寬，峰分離度降低。另外，體積過載還會(huì)影響峰保留時(shí)間，對(duì)保留時(shí)間短的組分影響更大，而對(duì)于較后面流出的峰影響較小。

解決方法：為選擇合適的進(jìn)樣體積，需要計(jì)算在最佳流速下允許樣品進(jìn)樣的最大體積。最大體積的計(jì)算公式為：

其中:L為柱長(zhǎng)（mm），dc為內(nèi)徑（mm），dp為粒徑（μm）。如果小伙伴嫌棄公式太繁瑣，也沒有關(guān)系，貼心的小編已經(jīng)把我們常用的各規(guī)格色譜柱列出：

盡管上表中各個(gè)數(shù)據(jù)是嚴(yán)格按照公式計(jì)算出來的，但是這個(gè)數(shù)據(jù)并不絕對(duì)。色譜是經(jīng)驗(yàn)科學(xué)，較之其他學(xué)科需要更多的實(shí)踐。當(dāng)然，理論也為我們指引了方向，讓我們能少走彎路。

色譜柱的質(zhì)量過載和體積過載都會(huì)對(duì)色譜分析結(jié)果產(chǎn)生不良影響，包括分離效果降低、保留時(shí)間變化以及檢測(cè)器響應(yīng)降低等。為了避免這些不良影響，需要根據(jù)色譜柱的承受能力和樣品的濃度合理調(diào)整進(jìn)樣量和進(jìn)樣體積，同時(shí)選擇合適的色譜柱和優(yōu)化分析方法也是預(yù)防色譜柱過載的有效措施。此外，定期對(duì)色譜柱進(jìn)行清洗和保養(yǎng)也是保證其分離效果和使用壽命的重要步驟。